ELISA试剂盒对于植物病毒材料的固定，丙酮用得最多，乙醇次之。因为丙酮对病毒的抗原性损害为最小，但对于那些不稳定的病毒，则应避免固定。

     在应用免疫酶技术时，固定处理对酶的活性的影响也得心中有数。许多固定剂对抗原的活性都 会有所损害，例如，福尔马林对蛋白抗原的固定造成抗原性的破坏非常明显。因此，对福尔马林的使用必须严格控制浓度，一般使用的福尔马林浓度为10%，尽管 如此，对抗原的抗原性还是有损害，所以必须进行抗原修复。

    ELISA试剂盒另外，对于碱性磷酸酶，在4℃下，丙酮固定一昼夜，能丧失30%的活性，如用丙酮固定后包埋，则丧失70%的活性；在4℃下，福尔马林固定2－4h，则丧失25%的活性。

     固定条件对标本的固定效果作用较大。

     固定剂浓度：丙酮最常用的是100%；乙醇最常用95%，但是70%乙醇的固定力为最强；福尔马林常用10%。

     固定的温度：一般而言，固定作用随温度升高而加强，ELISA试剂盒室温是最常用的。固定温度可以－70－30℃。应根据不同的抗原使用不同的温度，麻疹病毒应在－20－40℃用丙酮固定30min，而酶可以37℃用乙醇固定15min.

     固定液的pH：一般以所用固定剂的pH为准，但若以酶去除某些抗原表面的蛋白衣膜时，应根据所用酶的性质调节pH。