1.符号办法 杰出的酶结合物取决于两个条件：即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备符号抗体至关重要，由于特异性免疫反响随抗体活性和纯度的添加而增强。在酶符号过程中，抗体的活性有所下降，故需求纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好运用亲和层析提纯的抗体，可进步敏感性，并且可稀释运用，削减非特异性吸附。
酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化法。郭春祥树立的HRP符号抗体的改良过碘酸钠法简单易行，符号作用好，特别适用于实验室的小批量制备。其符号程序为：将5μg HRP溶于0.5ml蒸馏水中，参加新鲜制造的0.06 mol/L的过碘酸钠（NaIO4）水溶液0.5ml，混匀置4℃冰箱30分钟 ， 取出参加0.16mol/L的乙二醇水溶液0.5ml，室温放置30分钟后参加含5(g纯化抗体的水溶液1ml，混匀并装透析袋，以0.05mol/L、pH9.5的碳酸盐缓冲液于4℃冰箱中渐渐搅拌透析6小时（或过夜）使之结合，然后吸出，加硼氢化钠（NaBH4）溶液（ 5(g/ml)0.2ml，置4℃冰箱2小时，将上述结合物混合液参加等体积饱满硫酸铵溶液，置4℃冰箱30分钟后离心，将所得沉积物溶于少量0.02mol/L、pH7.4PBS中，并对之透析过夜（4℃），次日离心除掉不溶物，即得到酶标抗体，用0.02mol/L、pH7.4PBS稀至5ml，进行测定后，冷冻干燥或低温保存。
2.酶标抗体符号作用测定：测定内容包含酶和抗体活性、结合物中酶含量和IgG含量、酶与IgG摩尔比值以及结合率。
(1) 酶与抗体的活性 常用琼脂分散或免疫电泳法，使抗原与抗体构成沉积线，经PBS漂洗1天，再以蒸馏水浸泡1小时，将琼脂凝胶片浸于酶底物溶液中着色，如果呈现应有的色彩反响，再用生理盐水浸泡，色彩依然不褪，表示结合物既有酶的活性，也有抗体活性。杰出的结合物在显色后，琼扩滴度应在1:16以上。另一个测定办法是用系列稀释的酶标抗体直接以ELISA(酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒)办法进行方阵滴定，此法不只能够测定符号作用，还能够断定酶标抗体的运用浓度。