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pmsf纯化蛋白用途有哪些

2020-10-28

PMSF,化学物质苯甲基磺酰氟的英文简称,是一种蛋白酶抑制剂,也是细胞裂解液中的一种成分。

PMSF,化学物质苯甲基磺酰氟的英文简称,是一种蛋白酶抑制剂,也是细胞裂解液中的一种成分。

pmsf纯化蛋白用途:

PMSF为蛋白酶抑制剂,在纯化过程中,为了防止细菌本身的蛋白酶降解待纯化的目的蛋白,通常在破碎菌体,上柱的过程中会加PMSF。PMSF可抑制多种蛋白酶活性,为防止蛋白降解,提高得率,一般都要加。

pmsf纯化蛋白的使用介绍:

1) 抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);

2) 10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO进行配置,储存浓度同样为100mM

3) 在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.;

4) 工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM;

5) 在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入)

注: PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF有剧毒没使用前应做好防御措施。