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几种感受态细胞的用途、基因型和特点

2020-10-28

pLysS菌株含有pLysS质粒,因此具有氯霉素抗性。pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。

1、DH5菌株

用途:克隆菌,用于分子克隆、质粒提取。

基因型:supE44△lacU169(?80lacZ△M15)

       hsdR17 recAl endAl gyrA19

       thi-1 relAl

特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘性平板的抑制型菌株.其?80lacZ△M15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。recAl和endAl的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒的提取。

2、TOP10菌株

用途:克隆菌,用于分子克隆,质粒提取。

基因型:F_ mcrAΔ(mrr-hsd RMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15△lacⅩ74 recA1 deoRaraD139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG

特点:一种用于铺制与培养质粒平板和粘粒平板的重级缺陷的抑制型菌株。其中φ80 lacZΔM15基因的产物可与pUC载体编码的β-半乳糖苷酶氨基端实现α-互补,可用于蓝白斑筛选。该菌株适用于高效的DNA克隆和质粒扩增,能保证高拷贝质粒的稳定遗传。

3、JM109菌株

用途:克隆菌,用于分子克隆。

基因型:recAl supE44 endAl hsdR17

       Gyr A96 relAl thiΔ(lac-proAB )

       F’[traD36 proAB+ lacZ△M15]

特点:一种支持带有琥珀突变的载体生长的重组缺陷的抑制型菌株,对转染的DNA有修饰作用而无限制作用。

4、BL21(DE3)菌株

用途:表达菌,可用于表达非毒性蛋白

基因型:hsdSgal (c I TS857indl Sam7 nin5 lacUV5-T7)

特点:该菌株用于高效表达克隆于含有T7噬菌体启动子的表达载体的基因。T7噬菌体RNA聚合酶位于噬菌体DE3区,该区整合于BL21染色体上

5、BL21(DE3)pLysS菌株

用途:表达菌,可表达毒性蛋白和非毒性蛋白。

基因型:F-, ompT hsd(rBB-mB-),gal,dcm(DE3, pLysS,Camr)

特点:pLysS菌株含有pLysS质粒,因此具有氯霉素抗性。pLysS质粒含有表达T7溶菌酶的基因,能够降低目的基因的背景表达水平,但不干扰目的蛋白的表达。