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★反转录的基本原理和注意事项

★低丰度模板、复杂模板的高效反转录对策

★荧光定量的基本原理和计算方法

★高灵敏度、高特异性、高准确率的目的基因检测

★高GC模板和样本杂质的对抗方案

★用荧光定量实验来测序

FastKing cDNA第一链合成试剂盒是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组DNA污染的反转录系统。本试剂盒含有高效去除基因组DNA的gDNase；通过42℃，3 min即可去除gDNA，有效避免Total RNA中基因组DNA的干扰。本试剂盒所含的高效反转录酶FastKing RT Enzyme，是通过分子改造后的新型反转录酶，特别增加了疏水motif，具有更强的RNA亲和性和热稳定性，从而进一步提高了其反转录效率和反应速率，42℃、15 min即可完成cDNA第一链的合成。另外，由于新型酶与RNA亲和力的增强，使其在通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板和抗逆性等方面的表现也更为的突出。

产品特点：

● 反转录酶修饰了疏水motif，大大提高对RNA模板的亲和力和热稳定性，反转效率超过95%
● 灵敏度再次提升，低至0.1 ng的模板也能被准确识别
● 抗逆性好，无惧复杂模板，抵御杂质干扰
● 保持一贯优势，21 min高效制备无基因组残留的cDNA

实验例：

图1. 使用TIANGEN FastKing RT kit（KR116，左）及国外A 公司同类产品（右）反转录小鼠RNA，使用TIANGEN FP205进行定量MM5 基因，展示扩增曲线和熔解曲线。RNA 使用量分别为1000 ng，100 ng，10 ng，1 ng。结果显示，TIANGEN KR116 反转录梯度清晰，Ct 值靠前，并且对于低丰度模板（1 ng，蓝色箭头）的反转录具有明显优势。

图2. 使用TIANGEN FastKing RT kit（KR116）及A 公司同类产品分别反转录大鼠的正常RNA 样本（红色），酚类残留量大的RNA 样本（绿色），和醇类残留量大的RNA 样本（蓝色），使用TIANGEN FP205 进行定量RNC 基因，展示扩增曲线和平均Ct 值。结果显示，TIANGEN KR116 反转录后定量Ct 值靠前，并且抗逆性优秀，对于高杂质残留的模板具有明显优势。