本系列试剂盒能够通过质粒模板实现蛋白的大量表达。本系列试剂盒采用转录和翻译非偶联的方法，试剂盒中提供SP6 RNA聚合酶，NTP，RNase Inhibitor以及Transcription Buffer LM，加入模板后先完成DNA的转录，再配合麦胚无细胞蛋白表达系统预混mix完成mRNA的翻译，该mix中包含蛋白翻译的所有必需酶类、各种tRNA和离子，从而获取目的蛋白。本系列试剂盒可选择小、中、大三种表达规模，利用双层液相反应法（Bilayer）表达目的蛋白，小规模反应蛋白表达纯化后可达500 μg左右，大规模表达可达4 mg，非常适合western blot、CBB染色等蛋白检测实验和蛋白结构解析以及免疫共沉淀、酶功能检测、抗体检测等常见蛋白质功能解析。特别地，本系列试剂盒还支持多个质粒模板在一个体系中同时表达，并且可以在表达之后正确模拟体内的蛋白复合体自组装。此外，本系列中的C7H和C7G试剂盒专门为表达His标签蛋白和GST标签蛋白做特殊优化，使得纯化后的蛋白纯度更高。

产品特点：

操作简单：采用Bilayer 反应方法，不需要特殊仪器，只需加入模板即可进行反应

体系灵活：可以根据后续应用自由选择小、中、大三种不同的表达规模

功能模拟：可以同时表达多个蛋白，并且表达之后的蛋白可以正确模拟体内相互结合的情况

表达高效：一天内完成蛋白表达，蛋白表达量可达0.5-4 mg

适用面广：特别针对His标签蛋白或GST标签蛋白的表达进行特殊优化，提高纯度

实验例

建议使用质粒模板进行蛋白表达。可以使用pEU系列质粒作为表达载体，将带有起始密码子和终止密码子的cDNA克隆至载体上，提取质粒后直接用于蛋白表达。亦可使用其他带有SP6启动子的表达载体进行蛋白表达，不要使用T7启动子。

蛋白翻译采用双层液相反应法（Bilayer Reaction Method），通过反应液和麦胚裂解物造成的密度差，相互渗透，在液面相交处发生反应。随着时间的推进，溶液逐渐由两相变为单一的混合物而终止。

使用WEPRO 7240G/H试剂盒分别小规模表达多个GST标签蛋白和His标签蛋白，用考马斯亮蓝（CBB）染色检测（PAGE图）蛋白表达量，并用对应方法纯化后，检测蛋白得率和纯度。结果显示，WEPRO 7240G/H表达蛋白成功率高，纯化后蛋白得率可达300-600 μg，纯度高，适合下游各类蛋白结构和功能研究。

HIV的病毒感染因子（Viral Infectivity Factor，VIF）可以与宿主细胞的细胞因子共同组成E3泛素连接酶复合物，通过降解宿主蛋白入侵宿主细胞。复合物由Rbx1，ElonginB，ElonginC，SOCS1，Cullin2五个蛋白构成。将前四个蛋白的质粒和GST-tagged Cullin2质粒用WEPRO 7240在一个体系内同时表达，GSH纯化后使用CBB染色检测。结果显示，5个蛋白均成功表达，并且经GSH纯化后，5个蛋白均可成功标记，证明5个蛋白在分别表达成功后，在体系内结合形成了复合体。WEPRO 7240不但可以成功同时表达多个蛋白，并且可以保持蛋白的结构和功能，在in vitro体系中正确模拟in vivo蛋白复合体的组装。