TIANSeq Stranded RNA-Seq Kit (Illumina)是针对Illumina高通量测序平台开发的链特异性转录组文库构建专用试剂盒。本试剂盒采用快速一管式的操作流程,可对RNA样本进行快速文库构建,在双链cDNA合成后,样本的末端修复和dA尾添加一步完成,所得产物无需纯化即可直接用于接头的连接。此外,试剂盒采用专门设计的高效高保真聚合酶,所获得的PCR富集产物保真度高、无碱基偏好性。
试剂盒所适用的起始样本为去除rRNA的总RNA(保留了mRNA和其他的非编码RNA) 或者从总RNA中直接分离获得的mRNA。总RNA样本的起始模板量为10 ng~1 μg;mRNA样本的起始模板量低至1 ng。
适用范围:适用于Illumina高通量测序平台RNA文库的构建。
适用样本量:10 ng~1 μg的总RNA ;低至1 ng起始的动、植物及真菌的mRNA。
产品特点
? 可针对mRNA和除rRNA外的非编码RNA(如lncRNA)进行链特异性转录组分析。
? 操作流程简便,可实现RNA样本的快速文库构建。
? 文库转化率高,可用于低至1ng mRNA起始量样本文库的高效转化。
? PCR富集过程中保真度高,不存在碱基偏好性。
实验数据
1、成库量比较
图1. 以1 μg 人293 T Cell的总RNA为建库样本,NR103定向RNA建库试剂盒的成库量明显高于V公司、K公司及N公司的同类产品。
2、转录本覆盖度均匀
图2. 以1 μg 人293 T Cell的总RNA为样本,NR103定向RNA文库试剂盒的建库测序数据表明转录本从5’端至3’端具有高度均匀的覆盖度,优于V公司,与N公司及K公司产品性能相当。
3、不同样本起始量的文库间一致性高
图3. NR103定向RNA文库试剂盒兼容10 ng-1 μg 总RNA起始量,不同起始量下所构建的文库一致性高。以人293 T Cell细胞为测试样本,数据显示,在10ng和1 μg的总RNA起始量下,文库间基因表达量检测相关系数达到0.99以上,数据一致性高。