Total Superoxide Dismutase Assay Kit with WST-8

总SOD活性检测试剂盒（WST-8法）

产品简介：

总SOD活性检测试剂盒（WST-8法）是一种基于WST-8的显色反应，通过比色来检测细胞、组织或其它样品中SOD即超氧化物歧化酶活性的试剂盒。超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, SOD）能催化超氧化物阴离子（O₂^。-）发生歧化作用，生成过氧化氢（H₂O₂）和氧气（O₂），是生物体内一种重要的抗氧化酶。

目前有多种SOD活性测定法，其中NBT（氮蓝四唑）法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差，易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用，抑制百分率达不到100%等，从而使检测的灵敏度和精确度受到影响；细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法，但细胞色素C氧化活性高，易受样品中的还原剂干扰，另外该方法需要连续测定吸光度值，对于SOD的检测灵敏度比较低，所以不太适合大批量样本的检测。

目前测定SOD比较先进的方法包括WST-1法和WST-8法，其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的WST-8法，可以检测出低达0.5U/ml的超氧化物歧化酶。WST-8法的原理参考图1，WST-8可以和黄嘌呤氧化酶（Xanthine Oxidase, XO）催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料（formazan dye），由于SOD能催化超氧化物阴离子发生歧化作用，所以该反应步骤可以被SOD所抑制，因此SOD的活性与甲臜染料的生成量成负相关，从而通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。

   WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物，可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力，适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时，*抑制百分率可以接近100%，并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰，使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。

   本试剂盒的性能优于同类产品总SOD活性检测试剂盒（NBT法）。本产品的用途与同类产品总SOD活性检测试剂盒（NBT法）相同，等量SOD导致的吸光度变化值显著大于NBT法，线性范围更宽。本试剂盒提供的SOD样品制备液能直接裂解细胞，无需匀浆，操作更加便捷。

   本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢，会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法，能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如，对于SOD标准品的检测，标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时，对于检测结果仍无显著影响。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。

产品组成：

注意事项：

1、待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。

2、细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液，否则会干扰本试剂盒的检测。     

3、抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰，例如0.1mM ascorbic acid，5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。所以需要设置使用说明中的空白对照3来消除样品中的抗氧化物的干扰。

4、标准品稀释时所用的稀释液应尽量与样品一致。样品用试剂盒提供的SOD样品制备液制备时，标准品也建议使用SOD样品制备液进行稀释；当样品为血液等无需处理的样品时，建议使用试剂盒提供的SOD检测缓冲液稀释标准品。

5、酶溶液有时会被分成两层，因此忽略离心混匀步骤会导致实验结果不准确。

6、为提高实验准确性，建议每个样品进行复孔实验。

7、本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。