1．实验原理

染料2，6二氯靛酚的颜色反应表现两种特性，一是取决于其氧化还原状态，氧化态为

深蓝色，还原态变为无色；二是受其介质酸度的影响，在碱性溶液中呈深蓝色，在酸性介质

中呈浅红色。

维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以被人们称为抗坏血酸，主要有

还原型及氧化型两种。

用蓝色的碱性染料标准溶液对含维生素C的酸性浸出液进行氧化还原滴定，染料被还

原为无色，当到达滴定终点时，多余的染料在酸性介质中则表现为浅红色，由染料用量计算

样品中还原型抗坏血酸的含量。

2．仪器、试剂

①2g／100mL偏磷酸溶液。

②2g／100mL草酸溶液。

③抗坏血酸标准溶液(1mg／mL)：准确称取100mg(准确至0．1mg)抗坏血酸溶于

2％草酸中，并稀释至l00mL。现配现用。

④2，6一二氯靛酚溶液：称取碳酸氢钠52mg溶解在200mL热蒸馏水中，然后称取2，6二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中，冷却定容至250mL，过滤至棕色瓶中，贮存于冰箱内。每星期标定一次。

⑤0．001mol／L KIO3标液：吸取0．1mol／L K1O3溶液5．0mL，放入500mL容量瓶内，加水至刻度，摇匀。每毫升溶液相当于抗坏血酸0．008mg。

⑥0．5％淀粉溶液。

⑦6％KI溶液。

3．操作步骤

(1)2，6-二氯靛酚溶液标定 吸取lmL已知浓度抗坏血酸标准溶液于50mL锥形瓶中，

加10mL 2％草酸，摇匀，用染料2，6一二氯靛酚滴定至溶液呈粉红色，在15s不褪色为终点。

同时另取10mL2％草酸做空白试验。计算滴定度T：


式中 T——每毫升2，6二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的质量，mg／mL；

c——抗坏血酸的浓度，mg／Ml;

V——吸取抗坏血酸标准溶液的体积，mL；

v1——滴定抗坏血酸溶液所用2，6一二氯靛酚溶液的体积，mL；

v2——滴定空白所用2，6-二氯靛酚溶液的体积，mL。

(2)样液制备 称取具有代表性样品的可食部分l00g，放入组织捣碎机中，加l00mL

2％草酸，迅速捣成匀浆。称10～40g浆状样品，用2％草酸将样品移入l00mL容量瓶中，

并稀释至刻度，摇匀过滤。若滤液有色，可按每克样品加0．4g白陶土脱色后再过滤。

(3)滴定 吸取iomL滤液放入50mL锥形瓶中，用已标定过的2，6二氯靛酚溶液滴

定，直至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时做空白试验。

4．结果计算

维生素c含量(mg／100g)

式中V——滴定样液时消耗染料溶液的体积，mL；

V0——滴定空白时消耗染料溶液的体积，mL；

T——2，6-二氯靛酚染料滴定度，mg／mL；

A——稀释倍数；

W——样品重量，g。

平行测定结果用算术平均值表示，取三位有效数字，含量低的保留小数点后两位数字。

平行测定结果的相对相差，在维生素C含量大于20mg／100g时，不得超过2％，小于

20mg／100g时，不得超过5％。

5．注意事项

①靛酚法测定的是还原型抗坏血酸，方法简便，较灵敏，但特异性差，样品中的其他

还原性物质(如Fe2+、Sn2+、Cu2+等)会干扰测定，使测定结果偏高。

②所有试剂的配制最好都用重蒸馏水。

③样品进入实验室后，应浸泡在已知量的2％草酸液中，以防氧化，损失维生素C；贮

存过久的罐头食品，可能含有大量的低铁离子(Fe2+)，要用8％的醋酸代替2％草酸。这

时如用草酸，低铁离子可以还原2，6一二氯靛酚，使测定数字增高，使用醋酸则可以避免这种情况的发生。

④整个操作过程中要迅速，避免还原型抗坏血酸被氧化。

⑤在处理各种样品时，如遇有泡沫产生，可加入数滴辛醇消除。

⑥测定样液时，需做空白对照，样液滴定体积扣除空白体积。