科研血清是指血液凝固后,在血浆中除掉纤维蛋白原别离出的淡黄色通明液体或指纤维蛋白已被除掉的血浆。其主要效果是供给基本营养物质、供给激素和各种成长因子、供给结合蛋白、供给促接触和扩展因子使细胞贴壁免受机械损害、对培养中的细胞的起到某些维护效果。
科研血清是由血浆去除纤维蛋白原而构成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清是血浆中不含纤维蛋白原的胶状液体,具有维持血液的正常粘度、酸碱度、渗透压等效果。它主要由水和各种化学成分组成,这些化学成分包含白蛋白、α1、α2、β、γ-球蛋白,甘油三酯,总胆固醇,谷丙转氨酶等。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、成长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞成长或抑制成长活性是到达生理平衡的。对科研血清的成分和效果的研究虽有很大发展,但仍存在一些问题,主要是:
榜首:血清的成份或许有几百种之多,对其精确的成份、含量及其效果机制仍不清楚,尤其是对其间一些多肽类成长因子、激素和脂类等尚未充分认识,这给研究工作带来许多困难;
第二:血清都是批量生产,各批量之间差异很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保证每批血清的相似性极为困难,从而使试验的标准化和连续性受到限制;
第三:不能扫除血清中含有易变物质,这被认为是"瓶中恶化"的原因之一。
问题一:怎么冻结血清才不会使产质量量受损?
答:咱们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但有必要注意的是,融解过程中有必要规则地摇晃均匀。
问题二:保存血清hao的办法是怎样的呢?
答:咱们建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
问题三:为什么要热灭活科研血清?
答:加热能够灭活补体系统。发动的补体参加溶解细胞事件,刺激平滑肌缩短,细胞和血小板释放组胺,发动淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐运用热灭活血清。
问题四:有必要做热灭活吗?
答:试验显示,通过正确处理的热灭活血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的成长只有细小的促进,或完全没有任何效果,乃至一般由于高温处理影响了血清的质量,而构成细胞成长速率的降低。而通过热处理的血清,沉积物的构成会明显的增多,这些沉积物在倒置显微镜下调查,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37 ℃环境中,又会使此沉积物更增多,使研究者误认为是微生物的扩增。 因此咱们建议您,若非有必要,您能够不需要做热处理这一步。如此一来,不光节省您宝贵的时刻,更保证血清的质量!
问题五:血清冻结后发现有絮状沉积物呈现,该怎么处理?
答:血清中沉积物的呈现有许多种原因,但遍及的原因是由于血清中脂蛋白的变性所构成,血纤维蛋白(构成凝血的蛋白之一)在血清冻结后,也会存在于血清中,亦是构成沉积物的主要原因之一。但这些絮状沉积物,并不影响血清自身的质量。 若您欲去除这些絮状沉积物,能够将血清分装至无菌离心管内,以400g略微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。咱们不建议您以过滤的办法去除这些絮状沉积物,由于它或许会堵塞您的过滤膜。
问题六:为什么贮存在冰箱中的血清会呈现沉积?
答:咱们的胎牛血清没有预老化,贮存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)或许聚集而构成沉积或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20℃贮存胎牛血清,防止重复冻融。