膜再生液又称为Western抗体洗脱液,常用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。那么膜再生液的作用具体有哪些呢?
膜再生液又称为Western抗体洗脱液,常用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用。适用于Western化学发光检测后的蛋白膜的重复利用,尤其适用于PVDF膜,其次为硝酸纤维素膜。那么膜再生液的作用具体有哪些呢?
膜再生液的作用:
使用stripping buffer 可以去除一抗和二抗,然后可以重新利用膜。使用膜再生液可以对同一张膜进行多次WESTERNBLOT检测。在室温条件下,将用过的膜浸泡在膜再生液10-60分钟,可在不影响抗原蛋白的情况下清除膜上结合的抗体。随后,可以使用不同的抗体进行下一轮WESTERNBLOT实验。适宜从少量样品多次检测不同蛋白质。即使样品量并不匮乏,采用这一策略多次检测同一张膜上的蛋白,能省去给药处理、蛋白电泳和膜转移等耗费性步骤。而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。适用于清除硝酸纤维素膜或PVDF膜上结合的抗体,不影响抗原蛋白。
以上就是膜再生液的作用,但是由于重复使用,蛋白信号会有一定减弱,可以适当多用几次。