EasyGeno 重组试剂盒基于DNA序列同源性进行片段重组,可快速将单个或多个片段定向克隆到任意载体中。精心设计的一管式预混试剂2×EasyGeno Assembly Mix可将线性化的载体和插入DNA片段在同源区域进行重组连接,得到无缺口的闭环质粒,继而直接转化感受态细胞并筛选克隆。该方案摆脱了酶切位点的限制,仅需通过PCR在插入DNA的两端加入线性化载体15 bp的一致性序列,即可实现目的片段定向重组进入载体。重组反应可在恒温条件下快速进行 (50℃处理 15 min),并能保证所得阳性率在 95% 以上。本试剂盒还能够实现多目的片段同时定向重组进入载体以及高通量的载体构建。
■ 载体构建不受酶切位点限制
■ 15分钟实现片段和载体的重组
■ 效率是传统双酶切连接的 5-10 倍
■ 可实现 100 bp-15 kb片段构建进入载体
■ 可实现 1-5 个片段同时定向构建进入载体