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快速定点突变试剂盒 (KM101)

2023-02-23

体外定点突变技术是当前生物、医学各领域研究中的一种重要实验手段,多用于改造、优化目的基因;探索启动子的调节位点;以及研究蛋白质结构和功能之间的复杂关系。本试剂盒采用目前领先技术,可在目标载体上直接对靶基因进行单点突变,多点突变及插入或缺失突变,并且单点突变的突变率可达 90% 以上。另外,与以往的突变试剂盒需要多轮 PCR 及亚克隆等耗时耗力的步骤不同,本试剂盒的操作更为简便,从未突变菌株到突变菌株的构建只需要4 步。

产品特点
  • 简便快速:试剂盒采用非链取代式质粒扩增技术,只需 4 步即可实现由非突变菌株到突变菌株的转变,而不需要多轮 PCR 及亚克隆等耗时耗力的步骤。
  • 高效引物:试剂盒采用部分重叠的引物设计原则,可以扩增得到更多的突变质粒。
  • 应用广泛:本试剂盒不但可进行单点突变,还可以进行多点突变,且突变点数可达 5 个。
  • 适应性强:本试剂盒可对长达 10 kb 的质粒进行定点突变,基本覆盖所有常用质粒。
  •  突变率高:本试剂盒具有体外和体内双重消化甲基化质粒模板的功能,可以保证更高的突变率

点突变反应体系配制及反应程序

■ 在进行单引物多位点突变时,由于增加了突变位点个数,所以突变率较单点突变时会有所降低,根据我们的实验数据,当突变位点个数达到 5 个时,突变阳性率会降低到 50%。因此建议客户要增加验证的克隆子数。

■ 本试剂盒支持多引物多位点突变,这样可以在基因内更广泛的范围内同时进行突变实验。突变位点个数的上限仍然是 5个。

■ 建议在进行新的突变实验时要带上试剂盒附带的对照质粒和引物,以便于对实验问题进行分析。